EZ ECL pico化學發光液（超敏型）

產品簡介
EZ ECL pico化學發光液（超敏型）是一款增強型化學發光（ECL）HRP底物，可幫助用戶在免疫印跡分析過程中實現低皮克級的蛋白檢測（<10-12g），極其節省抗體。本產品一抗濃度范圍0.2-0.1μg/ml（以1 µg/mL儲存液稀釋1:1,000至1:5,000倍）；二抗濃度10-50ng/ml（以1 mg/mL儲存液稀釋1:20,000至1:100,000倍）。

產品型號：AP34L024/AP34L025

更新時間：2025-06-12

廠商性質：生產廠家

訪問量：4638

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產品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

蛋白與免疫

免疫磁珠蛋白制備蛋白定量蛋白電泳轉模&封閉抗體孵育顯色成像免疫組化

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品牌	Life-iLab/李記生物	貨號	AP34L024/AP34L025
規格	100mL	供貨周期	現貨
應用領域	環保,化工,生物產業,綜合

EZ ECL pico化學發光液（超敏型）‍

產品描述
EZ ECL pico化學發光液是一款高靈敏度的增強型化學發光(ECL)HRP底物，可幫助用戶在免疫印跡分析過程中實現低于皮克級的蛋白檢測(<1×10^-¹²g)，極其節省抗體。EZ ECL pico底物可為使用辣根過氧化物酶(HRP)偶聯物的免疫印跡實驗提供明亮的信號和低皮克級檢測靈敏度。該ECL底物能夠兼容各種膜、封閉液和寬范圍抗體稀釋液，以出色性能、通用性和高性價比，滿足用戶的免疫印跡應用需求。
EZ ECL pico底物的特點：
• 靈敏度高：檢測硝化纖維素膜或PVDF膜上低皮克級的蛋白條帶。
• 長信號持續時間：在條件優化情況下，經底物孵育的印跡條帶能夠持續輸出 6~8 h 的可檢測光信號。
• 試劑穩定：試劑盒在室溫下可穩定放置長達6個月，4℃條件下存放1年不影響使用。
建議稀釋濃度：
• 一抗濃度：建議以1mg/mL儲備液起1:1,000-1:5,000 或 0.2-1ug/mL
• 二抗濃度：建議以1mg/mL儲備液起1:20,000-1:100,000或10-50ng/mL
訂購信息

產品名稱	貨號	規格
EZ ECL pico化學發光液（超敏型）	AP34L024	100 mL
EZ ECL pico化學發光液（超敏型）	AP34L025	500 mL

產品組分

組分名稱	A液	B液
AP34L024（100 mL）	50 mL	50 mL
AP34L025（500 mL）	250 mL	250 mL

運輸與保存
藍冰運輸。4℃避光保存，有效期12個月。
使用方法

取出印記膜，加入合適的封閉液在溫室下孵育20~60 min，同時振蕩，以封閉膜上非特異性蛋白結合位點。
將膜從封閉液中取出，與一抗工作液在溫室孵育1 h，同時振蕩；或在28℃孵育過夜，不振蕩。
將足量的洗滌緩沖液加至膜上，保證緩沖液將膜*覆蓋。振蕩孵育≥5 min，更換洗滌緩沖液并重復該步驟4~6次。增加洗滌緩沖液體積，洗滌次數和洗滌時間有助于降低背景信號。
【注】：①孵育前，膜在洗滌緩沖液中的短暫淋洗會提高洗滌效率。②按前文建議的HRP標記二抗稀釋度非常重要的。
將HRP標記的二抗工作液與膜在溫室孵育1 h，同時振蕩。
重復步驟3，以除去未結合的HRP標記二抗。【注】：膜與HRP標記二抗孵育后必須進行*洗滌。
將A溶液與B液等比例混合，制備成工作液。每cm²膜使用0.01~0.1 mL工作液，工作液可以在溫室下穩定8 h。
【注】：暴露于日光或其他強光下可能損害工作液，為獲得最佳結果，請將此工作液保存在琥珀色瓶中光；實驗室的常見照明不會損害工作液。
將印記膜在工作液中孵育5 min。從工作液中取出印記膜，并置于一個塑料片或清潔的塑料紙（膜）中，用一張吸水紙吸除多余的液體，并從印記和塑料紙之間小心地壓出氣泡。
將包在塑料紙（膜）中的印記膜置于膠片暗盒中，蛋白質面朝上，除適用于膠片曝光的燈（如紅色安全燈）之外，關閉所有的燈。
【注】：①膠片必須在曝光期間保持干燥；②確保將多余的底物從膜和塑料紙上*去除；③在整個膠片處理期間，使用手套。
將X光膠片置于膜的上面。建議第一次曝光60 s。之后可調整曝光時間以達到最佳結果。化學發光反應在底物孵育后的前5~30 min期間是強烈的。這一反應可以持續幾個小時，但強度會隨時間下降，如有底物孵育后較長時間后曝光，曝光時間可能需要延長以獲得較強信號。如果使用磷光存儲成像設備（如Bio-Rad的分子成像儀系統）或CCD照相機可能需要較長的曝光時間。
【注】：膠片與膜之間的任何移動可能在膠片上造成人為的非特異信號。
使用合適的顯影劑和定影劑對膠片進行顯影。如果信號太強，則縮短曝光時間或將印記膜進行剝離并降低抗體濃度重新檢測。

注意事項

本產品僅限于科學實驗研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領域。
為獲得最佳效果，必須優化該系統的全部組分，包括樣品量、一抗和二抗濃度以及膜和封閉試劑的類型。
使用本產品比使用沉淀比色HRP底物檢測所需的抗體濃度低。為優化抗體濃度，請進行一次系統的點印跡分析。
沒有一種封閉試劑對所有系統而言都是最佳的，所以為每一個免疫印跡檢測系統找到最合適的封閉緩沖液非常必需。封閉試劑有可能與抗體產生交叉反應，導致出現非特異性信號。封閉緩沖液同時也會影響系統的靈敏性。當從一種底物轉換為另一種底物時，有時會出現信號衰減或背景增加的現象，原因可能是封閉緩沖液不適合新的檢測系統。
使用親和素/生*素檢測系統時，避免使用牛奶作為封閉試劑，因為牛奶中含有不定量的內源性生*素，會導致高背景信號。
保證洗滌緩沖液、封閉緩沖液、抗體溶液和底物工作液的使用體積，以確保在整個實驗過程中印跡膜*被液體覆蓋，避免膜變干。增大封閉緩沖液及洗滌緩沖液的使用量可以降低非特異性的信號。
為獲得最佳效果，在孵育步驟請使用搖床。
將Tween20(終濃度0.05~0.1%)加入封閉緩沖液和稀釋的抗體溶液，以降低非特異信號。使用高品質的產品，如去污劑。它保存在安瓿中，過氧化物和其他雜質含量很低。
不要使用diedanna作為緩沖液的防腐劑。diedanna是HRP的抑制。
避免手與膜直接接觸，實驗過程應戴手套或使用干凈的鑷子。
所有設備必須清潔且不沾染外來物質。金屬器械（如剪刀）不得具有可見的銹跡。銹跡可能導致斑點形成和高背景。
底物工作液在室溫下可穩定8 h。日光或任何其他強光下可能損害底物，為獲得最佳結果，將底物工作液保存在琥珀色瓶中，并避免長期暴漏在任何強光下，短時間暴漏于實驗室常規照明不會損害該工作液。