久久精品国产亚洲AV成人-久久精品国产亚洲AV麻豆-久久精品国产亚洲AV蜜臀-久久精品国产亚洲AV影院-久久精品国产亚洲精品-久久精品国产亚洲麻豆

免費咨詢熱線

021-50778506

技術文章

TECHNICAL ARTICLES

當前位置:首頁技術文章瓊脂糖凝膠與核酸電泳小知識分享

瓊脂糖凝膠與核酸電泳小知識分享

更新時間:2023-03-20點擊次數:2529
  影響核酸電泳遷移率的幾個因素
 
  1、核酸分子大小
 
  在一定濃度的瓊脂糖凝膠中,DNA片段遷移距離和其含有的堿基對數量成反比,因此可以通過與標準條帶遷移距離進行比較,由此得出目的條帶的大小,但這僅對雙鏈線性的DNA比較準確(DNA Marker一般為雙鏈線狀DNA),且對大于20kb的DNA不適用(普通瓊脂糖凝膠很難將其分開)。
 
  2、核酸分子構象
 
  DNA分子在電場中的遷移速度不僅和分子量有關,還和它本身的構象有關。相同分子量的線狀、開環和超螺旋DNA在瓊脂糖凝膠中的移動速度不一樣,移動速度次序為:共價閉環DNA>線性DNA>開環DNA。當瓊脂糖濃度太大時,環狀的DNA一般不能進入膠內(停留在孔中)。
 
  3、瓊脂糖濃度
 
  同樣的線狀DNA分子在不同濃度的瓊脂糖凝膠中的遷移速度不同,DNA電泳遷移率的對數和瓊脂糖凝膠濃度呈線性關系,凝膠濃度的選擇取決于DNA分子的大小。
 
  瓊脂糖凝膠濃度與線性DNA分辨范圍
 
  凝膠濃度(%)           線性DNA長度(bp)
 
  0.5                           1000~30000
 
  0.7                           800~12000
 
  1.0                           500~10000
 
  1.2                           400~7000
 
  1.5                           200~3000
 
  2.0                           50~2000
 
  4、電源電壓
 
  在低電壓時,線狀DNA片段的遷移速率和所加電壓成正比。但電壓增加,瓊脂糖凝膠的有效分離范圍將縮小。要使大于2kb的DNA片段的分離率達到最大,所使用的電壓不得超過5V/cm。
 
  5、電泳方式
 
  用于分離核酸的瓊脂糖凝膠電泳可分為垂直型及水平型(平板型)。垂直型電泳,一般用聚丙烯酰胺凝膠做為支撐物。水平型電泳時,凝膠板完全浸泡在電極緩沖液下1-2mm,故又稱為潛水式。目前更多用的是后者,因為它制膠和加樣比較方便,電泳槽簡單,易于制作,又可以根需要制備不同規格的凝膠板,節約凝膠,因而較受歡迎。
 
  6、嵌入染料的存在
 
  常用的熒光染料EB可以嵌入到堆積的堿基對之間,使其剛性更強,并使其遷移速率有所下降。
 
  7、電泳緩沖液的離子強度
 
  電泳緩沖液的組成和離子強度也能影響DNA的遷移速度。在離子存在很少的情況下(如無用蒸餾水配制凝膠),電導率最小,DNA幾乎不移動;在高離子強度的緩沖液中(如誤用10×電泳緩沖液),則電導率很高并產熱明顯,嚴重時能引起凝膠融化或DNA變性。

掃碼加微信

服務熱線

021-50778506

上海市浦東新區紫萍路908弄

[email protected]

Copyright © 2025和元李記(上海)生物技術有限公司 All Rights Reserved    備案號:滬ICP備2023007219號-1

技術支持:化工儀器網    管理登錄    sitemap.xml

主站蜘蛛池模板: 97亚洲熟妇自偷自拍另类图片 | 国产中文字精品久在线不 | 精品国产一区二区三区国产区 | 国精产品一二二区传媒公司 | 欧洲精品码一区二区三区免费看 | 久久久国产精品黄毛片 | 69老司机在线 | 亚洲AV无码一区二区A片成人 | 黄网站色视频免费看无下截 | 国产午夜精品一区二区三区漫 | 巨臀人妻中出中文字幕在线 | 国产aⅴ激情无码久久久无码 | 国产对白国语对白 | 国产成人精品久久久亚洲综合一区 | 国产成人精品午夜福 | 国产人妻人伦精品无码.麻豆 | 国产高级桑拿在线播放 | 国产精品欧美一区二区三区 | 国产欧美日韩灭亚洲精品 | 日韩免费网站 | 2025亚洲中文字幕在线 | 国产激情视频在线 | 国产无套粉嫩白浆在线 | 成人精品中国区免费 | 国产爆初菊在线观看免费视频 | 四虎国产精品成人无码 | 2024久久精品亚洲 | 国产91九色 | 精品国产免费一区二区三区五区 | 波多野结衣av一区二区无码 | 国产麻烦进| 成人国产亚洲欧美一区 | 丁香五月中文字幕第1网 | 少妇被又大又粗又爽毛片久久黑人 | 国产伦精品一区二区三区妓女原神 | 国产成人精品免高潮在线观看 | 国产精品十八禁一区二区三区 | 精品久久久一区 | 国产aⅴ视频免费观看国语 国产aⅴ视频一区二区三区 | 日本一道在线播放高清 | 狠狠色噜噜狠狠狠狠2024 |